產(chǎn)品概述
白介素13主要由有活性的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的。它與IL-4大約有30%氨基酸序列同源性并有很多相同的生物功能。IL-13在單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的分化和功能上具有多種作用。它能夠抑制單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的功能并能抑制單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生炎癥細(xì)胞因子。盡管人或小鼠IL-13在人的B細(xì)胞中與IL-4有相似的功能,但小鼠IL-13在小鼠B細(xì)胞中沒(méi)有那些功能。與IL-4不同,IL-4對(duì)人和小鼠T細(xì)胞是生長(zhǎng)和分化因子,IL-13無(wú)論在人或小鼠的T細(xì)胞中都沒(méi)有作用。
人IL-13 cDNA 氨基酸序列是含有132個(gè)氨基酸殘基的先驅(qū)蛋白,包含一個(gè)20個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)縮氨酸,裂解后構(gòu)成成熟蛋白。在氨基酸序列水平上,人IL-13與小鼠IL-13有58%的同源性。雖然人和小鼠IL-13在人細(xì)胞中有相同的活性,但在小鼠細(xì)胞中人IL-13比小鼠蛋白活性低很多。
產(chǎn)品原理
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法??谷薎L-13單抗包被于酶標(biāo)板上, 同時(shí)加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和生物素化的抗人IL-13抗體,標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-13會(huì)與加入于孔中的生物素化的抗人IL-13抗體及包被于酶標(biāo)板上的單抗結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應(yīng)孔中有IL-13,辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑變藍(lán),加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值,IL-13濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-13濃度。
產(chǎn)品性能
1. 靈敏度:最小可測(cè)人IL-13達(dá)60pg/ml 。
2. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。
產(chǎn)品組分及儲(chǔ)存條件
名稱
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96 Tests
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48 Tests
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保存條件
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1. 抗體包被板條 (Microwell Plate)
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8×12
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8×6
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2-8℃
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2.標(biāo)準(zhǔn)品 (Standard)
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2 支(凍干)
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1 支(凍干)
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2-8℃
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3.濃縮生物素化抗體 100× (Biotin-Conjugate)
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2 支 (30μl/支)
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1 支(30μl/支)
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2-8℃
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4.濃縮酶結(jié)合物 100× (Streptavidin-HRP)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃(避光)
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5.試劑稀釋液 (Assay Diluent)
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2 瓶(25ml/瓶)
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1 瓶(25ml/瓶)
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2-8℃
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6.濃縮洗滌液 20× (Wash Buffer Concentrate)
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1 瓶 (30ml/瓶)
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1 瓶(30ml/瓶)
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2-8℃
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7.顯色劑 (Substrate Solution)
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1 瓶(12ml/瓶 )
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1 瓶(6ml/瓶)
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2-8℃(避光)
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8.終止液 (Stop Solution)
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1 瓶(12ml/瓶)
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1 瓶(12ml/瓶)
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2-8℃
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9.封板膠紙
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2 張
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2 張
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10.說(shuō)明書
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1 份
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1 份
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試驗(yàn)所需自備儀器和試劑:
1. 酶標(biāo)儀(450nm檢測(cè)波長(zhǎng)濾光片,570nm或630nm校正波長(zhǎng)濾光片)。
2. 高精度加液器及一次性吸頭:0.5-10μl,2-20μl,20-200μl,200-1000μl。
3. 37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水、微量振蕩器、坐標(biāo)紙。
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